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涨姿势:今天给您推送的是核酸垂钓

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发表于 2020-11-1 20:01:47 | 显示全部楼层 |阅读模式

研锦生物

核酸捕获实验


标记芯片:生物素标记的RNA探针20-30ug/ml,溶解在DEPC水配置的PBS或水中


200ul注入OpenSPR固定的到链霉亲和素芯片

200ul注入OpenSPR固定的到链霉亲和素芯片表面



检测芯片:耐药细菌总DNA200ug/ml 1mg/ml200ul 注入仪器过芯片(5min



摸索再生缓冲液: 用不同溶度NaOH1mM-10mM)洗脱与探针结合的核酸(1-2min,并收集洗脱下来的与配体结合的核酸



检测再生后的芯片:再次通过不同溶度梯度的耐药细菌总DNA,检测配体是否经过碱处理后失效。


研锦生物

测序分析

1

引物设计: 


根据耐药细菌的16S设计引物 

2

扩增: 


通过PCR将不同溶度再生缓冲液收集起来的核酸进行特异扩增


鉴定: 


跑胶回收然后测序鉴定

 


注意事项: 


如果考虑到RNA降解的因素的话,可以考虑用肽核酸代替,这样有助于芯片的再次利用,肽核酸不会影响核酸之间的碱基互补配对。



研锦生物

谈谈money,量多优惠


1

合成RNA探针4OD目前是25/bp;

2

生物素标记 HPLC纯化,4OD价格是192元

3

一种抗性菌的预实验,包括设计引物,跑pcr检测,摸索各种条件,整体收费5000.00元整;

4

实验条件成熟后,包被探针并检测,提供洗脱条件,一张芯片2000.00元整。

 

以上报价根据实验具体情况,再协商。



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邮件:15337192895@163.com

电话 | 微信:15337192895 (张老师)

武汉市洪山区  华中农业大学悦创中心

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